HPLC泵的十個使用要點分析

HPLC是在經典的液相色譜法基礎上發展起來的，其以液體作為流動相，并采用顆粒極細的固定相的柱色譜分離技術。HPLC因其具有分離效能高、分析速度快、檢測靈敏度好、能分析和分離高沸點且不能氣化的熱不穩定生理活性物質的特點而被廣泛應用于生物化學、藥物及臨床分析，世界各國已將該法收載于藥典。

 

1、操作泵之前，用至少兩個體積（標準脫氣機30mL，對微脫氣機10mL）沖洗真空脫氣機，特別是當泵關閉了一段時間后(例如：過夜)，以及在通道中使用揮發性混合溶劑時，防止溶劑瓶內的玻璃濾頭(過濾器)堵塞及長菌，當濾頭表面有黑色或黃色污染層說明發生了堵塞，應立即清洗或更換。

2、將裝有溶劑瓶的溶劑箱放在泵上面或較高處。當在四元泵上使用鹽溶液或有機溶劑時，建議將鹽溶液接在下面的梯度閥口上，將有機溶劑接在上面的梯度閥口上，有機溶劑通道建議在水或鹽溶液通道的正上面。建議用水定期沖洗所有MCGV通道除去可能在閥口析出的鹽結晶。
 

3、定期檢查排液閥的過濾白頭。檢查方法：擰開排液閥，以水作流動相。

對于標準脫氣機(G1322A)，流速5ml/min水，若壓力大于10bar，則建議更換。 

對于微量脫氣機(G1379A)，流速2ml/min水，若壓力大于5bar，則建議更換。

4、當使用低流速時，檢查所有1/16英寸接頭有無滲漏（用壓力測試或漏液測試。每當更換泵密封墊時排液閥慮芯也應更換。

5、更換活塞密封墊時檢查活塞桿上是否有劃痕。有劃痕的活塞將導致輕度滲漏，并降低密封墊的使用壽命。應盡早更換有劃痕的活塞。

6、使用緩沖溶液時，關泵前先用水沖洗系統。當需要長時間使 用0.1摩爾或更高濃度的緩沖液時，建議選用密封墊清洗附件，以減少對密封墊及活塞桿的磨損。

7、如果使用了高濃度的緩沖鹽，可以考慮用熱水（50-60℃）來沖洗鹽通道來確保沒有緩沖鹽殘留在系統中。

8、更換活塞密封墊后應按照密封墊安裝步驟對其進行磨合，但磨合不適用于正相密封墊。

9、當泵頭安裝有柱塞清洗附件時，由于該附件中也有密封墊，這樣就會增加活塞桿運動時的阻力。所以開泵前一定要用10％異丙醇，并將其流速調至約2－3滴/分鐘使溶液流過沖洗裝置。(對于二元泵SL，如果不使用鹽溶液可以不開)10％異丙醇有助于降低水的表面張力，并有抑菌作用。不要用其它溶劑代替。
 

10、當泵頭安裝有沖洗附件而不開啟10％異丙醇，會使密封墊及活塞桿的壽命減短(二元泵SL除外)，泵頭如果發出“吱吱”聲不影響使用和泵的精度如果有必要，可以改變壓縮因子（compressibility）來達到更好的效果。